Worthington解离酶：中性蛋白酶（分散酶）详情解析

艾美捷Worthington中性蛋白酶（分散酶）：

中性蛋白酶（分散酶）是由多粘芽孢杆菌产生的一种细菌酶 ，可水解非J性氨基酸残基的 N 端肽键，被归类为氨基内肽酶。其温和的蛋白水解作用使该酶特别适用于分离初级和次级（继代培养）细胞，因为它可以保持细胞膜的完整性。

在许多原代细胞分离和组织解离应用中，中性蛋白酶（分散酶）也经常与胶原酶和/或其他蛋白酶一起用作辅助酶。中性蛋白酶 (Dispase) 比上皮样细胞更有效地解离成纤维细胞样细胞，因此它也被用于差异分离和培养应用。其他优点是它的非哺乳动物（细菌）来源和被 EDTA 抑制的能力。

 

组织分离/原代细胞分离和细胞收获是酶在组织中的主要应用培养、干细胞研究和细胞生物学研究。细胞分离程序的目标是最大化功能上可行的分离细胞的产量。有许多参数可能会影响结果。酶的选择是一个重要参数。Worthington组织分离指南总结了这些酶如何完成组织分离和原代培养的“常规”操作细胞采集。

艾美捷Worthington中性蛋白酶（分散酶）特异性：

中性蛋白酶是一种非特异性金属蛋白酶。它切割纤连蛋白、胶原蛋白 IV 和较小程度的胶原蛋白 I，但它不切割胶原蛋白 V 或层粘连蛋白。它水解非J性氨基酸残基的 N 端肽键，并可能优先攻击具有暴露疏水性氨基酸残基的变性和细胞间蛋白质。据信每个亚基结合一个锌离子和四个钙离子。与其他产生中性、碱性或两种蛋白酶混合物的芽孢杆菌不同，多粘类芽孢杆菌是仅产生中性蛋白酶的三个种类之一（Fogarty 和 Griffin 1973）。

艾美捷Worthington中性蛋白酶（分散酶）应用：

组织分解和继代培养

防止不需要的细胞聚集

培养细胞的制备

将完整的表皮从真皮中分离出来，并从培养基中分离出完整的上皮层 (Kurt et al. 1989)

正常、二倍体细胞和细胞系的收获和转移 (Matsumura et. al 1975)

温和且完整的表皮细胞脱离（Kitano 和 Okada 1983）