1.实验技术-收藏吃灰去，深入浅出常规PCR

1.PCR 原理与过程

2.PCR 体系组分

3.PCR 应用

4.PCR 常见问题及解决方案

前言

        PCR（Polymerase Chain Reaction，聚合酶链式反应）是现代生物学中一项必不可少的技术，能进行体外扩增DNA序列，为基因组研究和分子诊断提供了有力的工具。

01 PCR原理与过程

PCR原理

        是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板以特定引物为延伸起点，利用脱氧核苷三磷酸 (dNTP)，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。

PCR过程

        变性:模板DNA经加热至93C左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备;

        退火:模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55C左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合

        延伸:DNA模板--引物结合物在TagDNA聚合酶的作用下，温度一般为72C，以dNTP为反应原料，把序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链。将这些步骤重复(“循环”)25-35次，即可按指数方式获得精确的目标DNA拷贝。

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