艾美捷热转移稳定性检测试剂盒包括一种荧光染料,可检测蛋白质聚集,因此可用于监测系统热应激条件下的蛋白质稳定性。通过热位移分析,可以很容易地确定大部分蛋白质聚集的温度。聚集温度是蛋白质稳定性的指标,并可用于优化最小化蛋白质聚集的条件,以及鉴定结合并赋予感兴趣蛋白质结构稳定性的配体。
使用相关的PROTEOSTAT®蛋白质重折叠和聚集传感试剂盒确定合适的蛋白质重折叠条件。增加聚集温度的条件会增加蛋白质的稳定性。
艾美捷热转移稳定性检测试剂盒特点:
1、一种简单、灵敏、均匀的荧光测定法,无需样品分离或稀释,能够加速优化蛋白质稳定性条件
2、即使事先不了解蛋白质的功能或配体结合位点,也可以检测配体结合
3、适用于广泛的温度、pH和离子强度范围,并与常用的缓冲剂和赋形剂兼容为仪器密集型技术的交叉验证提供了方便、互补的正交方法。

图:显示了山羊抗小鼠IgG(11.2 mg/ml,pH 7.4)的PROTEOSTAT®热转移稳定性试验的典型结果。使用RT-PCR仪器,以3°/分钟的速率将温度从30°C升高到99°C,同时连续读取荧光。蓝线表示原始荧光数据,红线表示相应的一阶导数轨迹,突出显示荧光强度曲线的斜率。一阶导数图提供了蛋白质的聚集温度(标签:最大斜率点)。
艾美捷热转移稳定性检测试剂盒参考文献:
Modulating the thermostability of Endoglucanase I from Trichoderma reesei using computational approaches: G. Bayram Akcapinar, et al.; Protein Eng. Des. Sel. 28, 127 (2015), Abstract;
Site-specific conjugation of monomethyl auristatin E to anti-CD30 antibodies improves their pharmacokinetics and therapeutic index in rodent models: F. Lhospice, et al.; Mol. Pharm. 12, 1863 (2015), Abstract;
A general approach to antibody thermostabilization: A.D. McConnell, et al.; MAbs 6, 1274 (2014), Application(s): Stability of antibodies, Abstract; Full Text
Modifications of cysteine residues in the transmembrane and cytoplasmic domains of a recombinant hemagglutinin protein prevents cross-linked multimer formation and potency loss: K.M. Holtz, et al.; BMC Biotechnol. 14, 111 (2014), Abstract;
An integrated approach to extreme thermostabilization and affinity maturation of an antibody: A.D. McConnell, et al.; Protein Eng. Des. Sel. 26, 151 (2013), Abstract;