Nanoprobes 棕榈酰纳米金相关说明书

Palmitoyl-NANOGOLD® 由与单个棕榈酰分子共价连接的 1.4 nm NANOGOLD® 颗粒组成。共轭是通过酰胺键连接到分子头部的羧基上。它旨在作为脂质标记，以与先前描述的未十钨酸盐膜标记类似的方式与胶束和其他双相系统1一起使用。2其结构如图1所示：

 

图 1： Palmitoyl NANOGOLD® 的结构（未按比例显示）。

Palmitoyl NANOGOLD® 以固体形式提供，从甲醇溶液中干燥。收到后应冷藏，并储存在-20°C。

艾美捷 Nanoprobes Palmitoyl NANOGOLD® 具有疏水性，可以插入胶束等系统中的有机相中。1它可溶于甲醇以及甲醇-三氯甲烷和甲醇-二氯甲烷混合物中。下面给出了甲醇溶液在特定波长下的消光系数：

波长 (nm) 消光系数*

280 2.25 X 10 5

420 1.12×10 5

* 测量 5 X 10 -6 M 甲醇溶液。

重金标记的脂质体可以通过将 Palmitoyl-Nanogold® 溶解在lv仿中，与水混合，蒸发lv仿，然后使用超声处理或其他常用制备方法形成囊泡来形成。1 Palmitoyl-Nanogold® 也可以用未标记的脂质稀释并用于制备标记较少的脂质体。将 0.1 至 1% Palmitoyl-Nanogold® 与未标记的脂质掺入通常适用于制备 Nanogold® 标记的脂质体，其性质和形态与没有金标记的脂质体相同。一旦掺入胶束或其他结构中，就可以使用按照与未标记棕榈酸相同的方式进行个别实验所需的程序。

Nanoprobes Nanogold® 试剂染色的一般注意事项：

基本上，正常的方法学可以成功地与 NANOGOLD® 免疫试剂一起使用。抗体和金的浓度与胶体金抗体的其他商业制剂相似。因此，类似的稀释剂和封闭剂是合适的。

主要区别在于结果：

NANOGOLD® 是一种J其均匀的 1.4 nm 直径金颗粒（约 10%）。

NANOGOLD® 偶联物不含聚集体。这与通常通过离心制备以去除最大聚集体并经常包含较小聚集体的其他胶体金结合物形成鲜明对比。

接近 1 NANOGOLD® 颗粒对 1 个探针分子使该产品与其他胶体金抗体制剂的 0.2 - 10 可变化学计量不同。

NANOGOLD® 颗粒不像其他胶体金那样对蛋白质具有亲和力。这减少了背景和错误标记。

与大多数其他胶体金相比，NANOGOLD® 与银的显影效果更好，因此具有更高的灵敏度。银增强可用于使免疫标记可用于光学显微镜和免疫印迹，并改善结果。

使用 艾美捷 Nanoprobes Nanogold® 染色剂建议：

由于 1.4 nm NANOGOLD® 颗粒非常小，用 OsO 4、醋酸双氧铀或柠檬酸铅过度染色可能会掩盖单个 NANOGOLD® 颗粒的直接可视性。提高 NANOGOLD® 可见性的三项建议是：

使用减少量或浓度的常用污渍。

使用较低原子序数的染色剂，例如NANOVAN，一种钒基染色剂。3

使用银显影剂（例如 LI SILVER 或 HQ SILVER）增强 NANOGOLD®。

艾美捷 Nanoprobes Nanogold® 用于光学显微镜的染色和银增强：

用 NANOGOLD® 标记的特征在银增强后在光学显微镜下会被染成黑色。应尝试不同的开发时间来确定哪个最适合您的实验。免疫标记程序与 EM 相似；下面给出了一个合适的程序。

在银增强之前，样品必须用去离子水冲洗。这是因为该试剂溶液中含有银离子，银离子与氯化物、磷酸盐和其他作为缓冲溶液成分的阴离子反应形成沉淀。下面给出了用 NANOGOLD® 和银增强进行免疫标记的程序。

1.用去离子水冲洗（3 X 1 分钟）。

2.可选（可能会降低背景）：用 0.02 M 柠檬酸钠缓冲液，pH 7.0（3 X 5 分钟）冲洗。

3.用新鲜混合的显影液将样品显影 5-20 分钟，或按照银试剂的说明进行。或多或少的时间可用于控制信号强度。可以使用一系列不同的开发时间，为您的实验找到最佳增强；通常较短的抗体孵育时间将需要较长的银显影时间。

4.用去离子水冲洗（2 X 5 分钟）。

5.如果需要，现在可以在检查前使用常用试剂对样本进行染色。

为了获得特别暗的银信号，可以用新鲜混合的显影剂部分重复银增强。